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三菱厭氧包“三步法”操作指南

更新時間:2025-10-21   點擊次數:12次
  三菱厭氧包(AnaeroPack™系列)作為實驗室厭氧微生物培養的核心耗材,憑借“無需加水、無需催化劑”的便捷性,通過化學反應快速構建無氧環境(30分鐘內氧氣濃度降至0%,同步產生約21%CO?),廣泛適配臨床微生物檢測、環境菌種分離等場景。其“三步法”操作流程圍繞“安全取袋-快速密封-規范培養”設計,兼顧效率與精度,具體操作指南如下:
  一、第一步:備樣取袋——基礎準備與規范操作
  此步驟核心是確保厭氧包未接觸空氣前保持活性,避免提前反應影響效果,需把控“選型-拆封-取袋”三個關鍵動作:
  適配選型:根據培養罐容積選擇對應規格厭氧包,標準2.5L培養罐匹配1袋AnaeroPack™-Anaero,3.5L罐需2袋,7.0L罐需4袋;若培養微需氧或嗜二氧化碳菌種,需對應選用AnaeroPack™-Microaero或AnaeroPack™-CO?型號。同時檢查鋁塑包裝完整性,若出現破損漏氣則需廢棄,避免失效產品影響培養。
  精準拆封:用剪刀沿鋁塑包裝上側預設線剪開,動作需快速平穩,避免剪刀劃破內部紙袋。包裝剪開后立即取出紙袋,嚴禁打開紙袋——紙袋內的化學試劑(如氫硼化物、碳酸鹽復合物)為密封狀態,打開會導致試劑受潮失效,無法完成產氣反應。
  樣品前置:取袋前需將接種好的培養基平板放入密封罐,平板堆疊高度不超過罐容積的2/3,預留足夠空間供氣體均勻擴散。若培養厭氧菌菌落計數,建議將平板倒置放置,防止冷凝水影響菌落形態。
  二、第二步:密封啟動——快速操作與環境構建
  此步驟是厭氧環境形成的關鍵,核心是“極速密封”,利用三菱厭氧包接觸空氣后的即時反應特性構建無氧體系:
  即時入罐:取出紙袋后10秒內放入密封罐,避免長時間暴露導致提前產氣。若使用多袋厭氧包,需將其分散平鋪在罐底或罐壁兩側,禁止疊放——疊放會導致局部反應熱量積聚,影響產氣均勻性,甚至降低氧氣吸收效率。
  密封檢查:放入紙袋后立即蓋緊密封罐蓋,旋轉罐蓋至聽到“咔嗒”鎖止聲,確保密封圈貼合罐口。可通過“按壓罐蓋測試”驗證密封性:輕壓罐蓋無明顯松動,松手后無氣流聲,即說明密封合格,防止外界空氣滲入破壞厭氧環境。
  反應啟動:密封后厭氧包自動啟動反應,通過內部化學試劑吸收罐內氧氣,同步生成CO?,無需額外添加水或催化劑。此時罐體會輕微發熱(正常反應放熱),屬正常現象,可放置于室溫環境等待30分鐘,待反應完成后再移入培養箱。
 

 

  三、第三步:培養廢棄——規范培養與安全處理
  此步驟聚焦“環境控制-過程觀察-廢棄處理”,保障培養效果與操作安全:
  恒溫培養:將密封罐放入培養箱,設置溫度需≤45℃,超出此范圍會導致厭氧包試劑失效,同時影響微生物生長活性。培養期間可通過透明罐壁觀察菌落生長情況,無需打開罐蓋——密封狀態下環境可穩定維持整個培養周期,打開會破壞無氧條件。
  效果驗證:若需確認厭氧環境是否達標,可在罐內放置厭氧指示劑(如美藍指示管),若指示劑由藍色變為無色,說明氧氣已去除,可正常培養;若仍為藍色,需檢查密封是否失效或厭氧包是否過期。
  安全廢棄:培養結束后,先將密封罐置于通風處冷卻30分鐘,待厭氧包降溫后再取出——反應殘留的化學試劑可能持續放熱,高溫狀態丟棄易引發風險。取出的廢袋需單獨丟棄,禁止與易燃物混放,避免殘余試劑發生意外反應。
  關鍵注意事項與場景適配
  儲藏要求:未使用的厭氧包需密封存放于陰涼干燥處,避免陽光直射與潮濕環境,鋁塑袋右下角印有失效期,需在有效期內使用,過期產品產氣效率會下降50%以上。
  特殊場景:野外采樣或現場檢測時,可搭配三菱密封袋替代培養罐,操作流程不變,密封袋透明特性便于現場觀察,且重量僅為培養罐的1/10,便攜性更強。
  常見誤區:禁止將不同型號厭氧包混合使用(如厭氧型與微需氧型),會導致氣體濃度紊亂;多袋使用時若空間有限,可借助隔板分隔,確保每袋均能充分接觸空氣完成反應。
  通過“備樣取袋-密封啟動-培養廢棄”三步操作,三菱厭氧包可快速構建穩定厭氧環境,操作耗時僅需2分鐘,相比傳統厭氧培養箱成本降低60%,且能避免危險氣體使用風險,成為中小實驗室厭氧培養的優選方案。